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    項目介紹

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(Polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE),是一種常用的根據(jù)蛋白質(zhì)分子量大小分離樣本中蛋白質(zhì)多肽的技術(shù)。PAGE有非變性聚丙烯酰氨凝膠電泳(Native-PAGE)和變性聚丙烯酰氨凝膠電泳(蛋白質(zhì)變性劑通常為SDS)。Native-PAGE過程中蛋白質(zhì)能保持完整狀態(tài),并依據(jù)分子量大小、形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開。而SDS-PAGE僅根據(jù)蛋白質(zhì)亞基分子量的不同就可以分開蛋白質(zhì)。


    樣品要求

    1.檢測組織量要求為100mg(即黃豆大?。?;

    2.細胞量要求為10^6及以上,細胞收集方式——貼壁細胞:倒掉培養(yǎng)基,pbs清洗2-3次,用細胞刮收集細胞,2000g,離心5min,然后去掉上清液,細胞沉淀干冰運輸; 懸浮細胞:2000g,離心5min,然后收集細胞沉淀,干冰運輸;

    3.血液樣本:全血采用EDTA-抗凝管裝,至少1ml,4度運輸,血清或白細胞采用干冰運輸;

    4.剩余樣本需要返還的項目,需要提前備注。在收到項目完整版結(jié)題報告一個月內(nèi)告知公司,逾期樣本將安排清理。如果樣本特別珍貴,需提前說明。一般情況下,樣本不予返還;樣本返回需要送樣方承擔(dān)返還費用(主要是干冰費和快遞費)。

    項目案列
    常見問題

    1.如何讀取SDS-PAGE結(jié)果

    電泳后肉眼無法觀察到蛋白分離,需要后續(xù)的染色技術(shù)??捡R斯亮藍染色和銀染是常規(guī)檢測和定量電泳分離蛋白質(zhì)的常用方法。經(jīng)過固定-染色-脫色等簡單處理后,可以清楚的觀察到蛋白質(zhì)的分布。

    2.如何儲存SDS-PAGE凝膠

    通常在每次實驗之前準備新鮮的SDS-PAGE凝膠。然而凝膠也可以在4℃的清水的儲存約一周。如果凝膠染色后不能及時拍照,則需要將其放入水中,以防止凝膠干燥和收縮。建議盡快拍攝染色結(jié)果,如果凝膠長時間浸泡在水中,條帶會散開

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