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    Shotgun蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定

    蛋白質(zhì)全譜分析也可稱為質(zhì)譜shotgun分析,指的是組分分析,研究對(duì)象是完整的組織、體液或其提取物,其目的在于鑒定出盡可能多的肽和蛋白質(zhì)分子。

    技術(shù)原理:

    蛋白質(zhì)膠條/混合溶液鑒定

    利用LC-ESI-MS/MS蛋白鑒定技術(shù)對(duì)膠條樣本(即SDS-PAGE樣本)、IP、co-IP、pull-down等純化溶液等中等復(fù)雜樣本進(jìn)行鑒定。

    蛋白膠點(diǎn)鑒定

    利用MALDI-TOF/TOF蛋白鑒定技術(shù)對(duì)考/銀染的2D或DIGE膠點(diǎn)樣本或者較純的蛋白樣本進(jìn)行蛋白鑒定。

    樣品要求
    鑒定類型樣本類型樣品量保存及運(yùn)輸方式
    Shotgun蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定蛋白溶液蛋白質(zhì)總量>10ug,溶液濃度>0.5ug/ul緩沖液不含去污劑NP40、Triton、×100等-80℃保存,干冰寄送
    蛋白質(zhì)膠條/混合溶液鑒定SDS-PAGE條帶條帶清晰可見
    蛋白混合溶液蛋白質(zhì)總量>10ug,溶液濃度>0.5ug/ul,緩沖液不含去污劑NP40、Triton、×100等
    蛋白質(zhì)膠點(diǎn)鑒定雙向凝膠電泳點(diǎn)膠點(diǎn)清晰可見
    SDS-PAGE條帶單一蛋白質(zhì),純度>90%;條帶清晰可見
    蛋白質(zhì)溶液單一蛋白質(zhì),純度>90%;蛋白質(zhì)總量>10ug,溶液濃度>0.5ug/ul


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