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           數(shù)據(jù)非依賴性采集( Data Independent Acquisition,DIA)定量技術(shù),將整個(gè)質(zhì)譜的掃描質(zhì)量范圍分為若干窗口,依次對(duì)每個(gè)窗口的所有離子進(jìn)行碎裂,采集全部子離子信息。利用業(yè)內(nèi)頂尖的商業(yè)化DIA分析軟件Spectronaut比對(duì)預(yù)先建立的譜圖庫(kù)即可實(shí)現(xiàn)定性確證和定量離子篩選。DIA是一種真正全景式、高通量的質(zhì)譜技術(shù),大大提高了定量的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性,同時(shí)也可實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)回溯分析。

    DIA具有以下特點(diǎn):      

    (1) 無(wú)歧視地獲得所有肽段的信息,不會(huì)造成低豐度蛋白信息的丟失。

    (2) 循環(huán)時(shí)間固定,掃描點(diǎn)數(shù)均勻,定量準(zhǔn)確度高。

    (3) 肽段的選擇沒(méi)有隨機(jī)性,數(shù)據(jù)可以回溯,對(duì)于復(fù)雜蛋白樣本,特別是低豐度蛋 白具有更優(yōu)異的重現(xiàn)性。

    與傳統(tǒng)質(zhì)譜定量“金標(biāo)準(zhǔn)”選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè) / 多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(SRM/MRM)相比,DIA具有以下特點(diǎn):

    (1) 無(wú)需提前指定目標(biāo) 肽段,適用于未知蛋白分析;

    (2) 無(wú)需優(yōu)化方法,獲得數(shù)據(jù)后再基于譜圖庫(kù)實(shí)現(xiàn)定性確證和定量離子篩選;

    (3) 通量無(wú)上限,適合大 規(guī)模蛋白定量分析。        

    數(shù)據(jù)非依賴采集(DIA):      

    ? 采集所有離子及碎片譜圖,不丟失任何信息,重現(xiàn)性好;

    ? 數(shù)據(jù)易于追溯,即使目前的水平無(wú)法發(fā)現(xiàn)某些蛋白/ 化合物,未來(lái)可以回溯;

    ? 無(wú)需優(yōu)化方法,對(duì)于易降解樣品可以即刻采集,獲得數(shù)據(jù)后再深入挖掘;

    ? 基于碎片離子(即母子離子對(duì))定量,選擇性好,與 SRM/MRM 相當(dāng);

    ? 循環(huán)時(shí)間固定,掃描點(diǎn)數(shù)均勻,定量準(zhǔn)確度高;

    ? 通量無(wú)上限,同時(shí)監(jiān)測(cè)所有目標(biāo)蛋白/ 化合物;

    ? 相同肽段不同翻譯后修飾位點(diǎn)的定量區(qū)分與辨別。


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